三菱厌氧包“三步法”操作指南

　　三菱厌氧包（AnaeroPack™系列）作为实验室厌氧微生物培养的核心耗材，凭借“无需加水、无需催化剂”的便捷性，通过化学反应快速构建无氧环境（30分钟内氧气浓度降至0%，同步产生约21%CO₂），广泛适配临床微生物检测、环境菌种分离等场景。其“三步法”操作流程围绕“安全取袋-快速密封-规范培养”设计，兼顾效率与精度，具体操作指南如下：

　　一、第一步：备样取袋——基础准备与规范操作

　　此步骤核心是确保厌氧包未接触空气前保持活性，避免提前反应影响效果，需把控“选型-拆封-取袋”三个关键动作：

　　适配选型：根据培养罐容积选择对应规格厌氧包，标准2.5L培养罐匹配1袋AnaeroPack™-Anaero，3.5L罐需2袋，7.0L罐需4袋；若培养微需氧或嗜二氧化碳菌种，需对应选用AnaeroPack™-Microaero或AnaeroPack™-CO₂型号。同时检查铝塑包装完整性，若出现破损漏气则需废弃，避免失效产品影响培养。

　　精准拆封：用剪刀沿铝塑包装上侧预设线剪开，动作需快速平稳，避免剪刀划破内部纸袋。包装剪开后立即取出纸袋，严禁打开纸袋——纸袋内的化学试剂（如氢硼化物、碳酸盐复合物）为密封状态，打开会导致试剂受潮失效，无法完成产气反应。

　　样品前置：取袋前需将接种好的培养基平板放入密封罐，平板堆叠高度不超过罐容积的2/3，预留足够空间供气体均匀扩散。若培养厌氧菌菌落计数，建议将平板倒置放置，防止冷凝水影响菌落形态。

　　二、第二步：密封启动——快速操作与环境构建

　　此步骤是厌氧环境形成的关键，核心是“极速密封”，利用三菱厌氧包接触空气后的即时反应特性构建无氧体系：

　　即时入罐：取出纸袋后10秒内放入密封罐，避免长时间暴露导致提前产气。若使用多袋厌氧包，需将其分散平铺在罐底或罐壁两侧，禁止叠放——叠放会导致局部反应热量积聚，影响产气均匀性，甚至降低氧气吸收效率。

　　密封检查：放入纸袋后立即盖紧密封罐盖，旋转罐盖至听到“咔嗒”锁止声，确保密封圈贴合罐口。可通过“按压罐盖测试”验证密封性：轻压罐盖无明显松动，松手后无气流声，即说明密封合格，防止外界空气渗入破坏厌氧环境。

　　反应启动：密封后厌氧包自动启动反应，通过内部化学试剂吸收罐内氧气，同步生成CO₂，无需额外添加水或催化剂。此时罐体会轻微发热（正常反应放热），属正常现象，可放置于室温环境等待30分钟，待反应完成后再移入培养箱。
 

　　三、第三步：培养废弃——规范培养与安全处理

　　此步骤聚焦“环境控制-过程观察-废弃处理”，保障培养效果与操作安全：

　　恒温培养：将密封罐放入培养箱，设置温度需≤45℃，超出此范围会导致厌氧包试剂失效，同时影响微生物生长活性。培养期间可通过透明罐壁观察菌落生长情况，无需打开罐盖——密封状态下环境可稳定维持整个培养周期，打开会破坏无氧条件。

　　效果验证：若需确认厌氧环境是否达标，可在罐内放置taptap下截（如美蓝指示管），若指示剂由蓝色变为无色，说明氧气已去除，可正常培养；若仍为蓝色，需检查密封是否失效或厌氧包是否过期。

　　安全废弃：培养结束后，先将密封罐置于通风处冷却30分钟，待厌氧包降温后再取出——反应残留的化学试剂可能持续放热，高温状态丢弃易引发风险。取出的废袋需单独丢弃，禁止与易燃物混放，避免残余试剂发生意外反应。

　　关键注意事项与场景适配

　　储藏要求：未使用的厌氧包需密封存放于阴凉干燥处，避免阳光直射与潮湿环境，铝塑袋右下角印有失效期，需在有效期内使用，过期产品产气效率会下降50%以上。

　　特殊场景：野外采样或现场检测时，可搭配三菱密封袋替代培养罐，操作流程不变，密封袋透明特性便于现场观察，且重量仅为培养罐的1/10，便携性更强。

　　常见误区：禁止将不同型号厌氧包混合使用（如厌氧型与微需氧型），会导致气体浓度紊乱；多袋使用时若空间有限，可借助隔板分隔，确保每袋均能充分接触空气完成反应。

　　通过“备样取袋-密封启动-培养废弃”三步操作，三菱厌氧包可快速构建稳定厌氧环境，操作耗时仅需2分钟，相比传统厌氧培养箱成本降低60%，且能避免危险气体使用风险，成为中小实验室厌氧培养的优选方案。